Avaliação de diferentes crioprotetores na conservação da pele de cutias, Dasyprocta leporina Linnaeus 1758 (Rodentia: Dasyproctidae), visando à formação de um banco de tecidos

Avaliação de diferentes crioprotetores na conservação da pele de cutias, Dasyprocta leporina Linnaeus 1758 (Rodentia: Dasyproctidae), visando à formação de um banco de tecidos

• Autor
• Eliabe David de Carvalho Costa
• Co-autores
• Alexsandra Fernandes Pereira , Luanna Lorenna Vieira Rodrigues , Lhara Ricarliany Medeiros de Oliveira , Matheus Barbosa do Nascimento
• Resumo

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  A criopreservação da pele pode ser uma ferramenta interessante para a conservação de Dasyprocta leporina. Assim, estabelecer protocolos de criopreservação, especialmente quanto à solução crioprotetora, é considerado como uma etapa fundamental para o sucesso desta ferramenta na conservação dos recursos genéticos. Portanto, o objetivo foi avaliar diferentes soluções crioprotetoras em amostras da pele derivadas do pavilhão auricular apical de D. leporina. Esta espécie possui importância ecológica, econômica e científica nos ecossistemas que habita, sendo interessante os bancos de recursos genéticos para a conservação da biodiversidade do planeta. Todos os procedimentos foram aprovados pelo Comitê de Ética e Uso de Animais (CEUA/UFERSA, no. 23091.001072/2015-92) e Instituto Chico Mendes de Conservação da Biodiversidade (ICMBio, no. 48633-1). Para tanto, amostras da pele (9,0 mm³) foram distribuídas entre o grupo não vitrificado (grupo controle) e grupos vitrificados pela técnica de vitrificação em superfície sólida com diferentes soluções de criopreservação: i) 3,0 M de etilenoglicol (grupo EG), ii) 3,0 M de EG com 0,25 M de sacarose (grupo EG-SAC), iii) 3,0 M de dimetilsulfóxido (grupo DMSO), iv) 3,0 M de DMSO com 0,25 M de sacarose (grupo DMSO-SAC), v) 1,5 M de EG com 1,5 M de DMSO (grupo EG-DMSO), vi) 1,5 M de EG, 1,5 M de DMSO e 0,25 M sacarose (grupo EG-DMSO-SAC). Todos os grupos tiveram como solução-base Meio Essencial Mínimo modificado por Dulbecco (DMEM) contendo 10% de soro fetal bovino. Os grupos foram fixados e processados para análise histomorfométrica (mensuração das camadas da pele, matriz extracelular, quantificação de halos perinucleares, e fibroblastos) usando histologia clássica. Todos os dados foram expressos como média ± erro padrão (um animal/uma repetição) e analisados por ANOVA seguido de teste de Tukey (P < 0,05). Quanto à análise da espessura da pele, a epiderme foi reduzida em todos os grupos vitrificados quando comparada ao controle (P < 0,05). Contudo, a espessura dos fragmentos do grupo EG não foi alterada pela criopreservação. Além disso, a derme foi reduzida nos grupos EG e DMSO-SAC quando comparados ao controle (P < 0,05). Quanto à espessura de pele, observou-se que EG (110,8 ± 13,6 µm), DMSO (143,7 ± 18,7 µm) e EG-DMSO-SAC (125,1 ± 17,9 µm) não foram afetados pela criopreservação, sendo similar ao controle (122,2 ± 46,9 µm). Independente da solução crioprotetora, o número de fibroblastos foi alterado pela criopreservação. Quanto aos halos perinucleares, o grupo controle apresentou 5,0 ± 2,0 e assemelharam-se os grupos EG-SAC (5,0 ± 4,6), DMSO-SAC (8,0 ± 4,8), EG-DMSO (5,0 ± 2,0) e EG-DMSO-SAC (4,0 ± 1,8). Quanto à avaliação da matriz proteica, todas soluções resultaram em alteração no percentual de fibras colágenas. Portanto, a combinação EG-DMSO-SAC resultou na melhor composição de crioprotetores para a conservação da pele do pavilhão auricular apical de D. leporina, possibilitando seu uso futuro em biotecnologias subsequentes, como a transferência nuclear de células somáticas e geração de células induzidas à pluripotência.

   

• Palavras-chave
• roedores silvestres, cutia, biobancos, vitrificação, tecidos somáticos
• Área Temática
• Ciências Biológicas

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